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Carnoy固定液 提供優(yōu)惠高品質試劑
產品名稱： Carnoy固定液
規(guī)格：100ml
用途：又稱卡諾氏固定液,由乙醇、乙酸等組成。RNADNA染色的固定,糖原的固定,能清除血性標本,可以用于細胞學固定。
注意事項：
儲存條件：室溫,避光,12個月
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載體和目的基因的切斷(切):通常采用限制性核酸內切酶(restriction endonuclease),簡稱限制酶,分別對載體DNA和目的基因進行切斷,以便于重組。能夠識別特定的堿基順序并在特定的位點降解核酸的核酸內切酶稱為限制酶。限制酶所識別的順序往往為4-8個堿基對,且有回文結構。由限制酶切斷后的末端可形成平端、3'-突出粘性末端和5'-突出粘性末端三種情況。形成粘性末端(cohesive end)者較有利于載體DNA和目的基因的重組。
載體和目的基因的重組(接):即將帶有切口的載體與所獲得的目的基因連接起來,得到重新組合后的DNA分子。
⑴粘性末端連接法:載體與目的基因通過粘性末端進行互補粘合,再加入DNA連接酶,即可封閉其缺口,得到重組體。
⑵人工接尾法:即同聚物加尾連接法。在末端核苷酸轉移酶的催化下,將脫氧核糖核苷酸添加于載體或目的基因的3'-端,如載體上添加一段polyG,則可在目的基因上添加一段polyC,通過堿基互補進行粘合后,再由DNA連接酶連接。
⑶人工接頭連接法:將人工連接器(即一段含有多種限制酶切點的DNA片段)連接到載體和目的基因上,即有可能使用同一種限制酶對載體和目的基因進行切斷,得到可以互補的粘性末端。
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