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細(xì)胞核分離試劑盒(蔗糖密度法) 提供優(yōu)惠高品質(zhì)試劑
產(chǎn)品名稱(chēng)： 細(xì)胞核分離試劑盒(蔗糖密度法)
規(guī)格：50T
用途：分離動(dòng)物的細(xì)胞核
注意事項(xiàng)：
儲(chǔ)存條件：—20℃,6個(gè)月
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細(xì)胞核分離試劑盒 提供優(yōu)惠高品質(zhì)試劑
RNA轉(zhuǎn)錄合成的基本過(guò)程:
1.識(shí)別:RNA聚合酶中的ζ因子識(shí)別轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn),并促使核心酶結(jié)合形成全酶復(fù)合物。
位于基因上游,與RNA聚合酶識(shí)別、結(jié)合并起始轉(zhuǎn)錄有關(guān)的一些DNA順序稱(chēng)為啟動(dòng)子。在原核生物中的啟動(dòng)子通常長(zhǎng)約60bp,存在兩段帶共性的順序,即5'-TTGACA-3'和5'-TATAATG-3',其中富含TA的順序被稱(chēng)為Pribnow盒。真核生物的啟動(dòng)子中也存在一段富含TA的順序,被稱(chēng)為Hogness盒或TATA盒。
2.起始:RNA聚合酶全酶促使局部雙鏈解開(kāi),并催化ATP或GTP與另外一個(gè)三磷酸核苷聚合,形成*個(gè)3',5'-磷酸二酯鍵。
3.延長(zhǎng):ζ因子從全酶上脫離,余下的核心酶繼續(xù)沿DNA鏈移動(dòng),按照堿基互補(bǔ)原則,不斷聚合RNA。
4.終止:RNA轉(zhuǎn)錄合成的終止機(jī)制有兩種。
⑴自動(dòng)終止:模板DNA鏈在接近轉(zhuǎn)錄終止點(diǎn)處存在相連的富含GC和AT的區(qū)域,使RNA轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物形成寡聚U及發(fā)夾形的二級(jí)結(jié)構(gòu),引起RNA聚合酶變構(gòu)及移動(dòng)停止,導(dǎo)致RNA轉(zhuǎn)錄的終止。
⑵依賴(lài)輔助因子的終止:由終止因子(ρ蛋白)識(shí)別特異的終止信號(hào),并促使RNA的釋放。               真核生物RNA轉(zhuǎn)錄后的加工修飾:
1.mRNA的轉(zhuǎn)錄后加工:
⑴加帽:即在mRNA的5'-端加上m7GTP的結(jié)構(gòu)。此過(guò)程發(fā)生在細(xì)胞核內(nèi),即對(duì)HnRNA進(jìn)行加帽。加工過(guò)程首先是在磷酸酶的作用下,將5'-端的磷酸基水解,然后再加上鳥(niǎo)苷三磷酸,形成GpppN的結(jié)構(gòu),再對(duì)G進(jìn)行甲基化。
⑵加尾:這一過(guò)程也是細(xì)胞核內(nèi)完成,首先由核酸外切酶切去3'-端一些過(guò)剩的核苷酸,然后再加入polyA。
⑶剪接:真核生物中的結(jié)構(gòu)基因基本上都是斷裂基因。結(jié)構(gòu)基因中能夠指導(dǎo)多肽鏈合成的編碼順序被稱(chēng)為外顯子,而不能指導(dǎo)多肽鏈合成的非編碼順序就被稱(chēng)為內(nèi)含子。真核生物HnRNA的剪接一般需snRNA參與構(gòu)成的核蛋白體參加,通過(guò)形成套索狀結(jié)構(gòu)而將內(nèi)含子切除掉。
⑷內(nèi)部甲基化:由甲基化酶催化,對(duì)某些堿基進(jìn)行甲基化處理。
2.tRNA的轉(zhuǎn)錄后加工:主要加工方式是切斷和堿基修飾。
3.rRNA的轉(zhuǎn)錄后加工:主要加工方式是切斷。
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